Tüm?r dokusunu kü?ük par?alar halinde k?y?n. Par?alar? sindirim tamponu olan bir tüpe aktar?n. Hücreleri ?evreleyen kollajen lifleri par?alan?r ve doku matrisini bozar. Ard?ndan, sindirilmi? par?alar? pelet haline getirin ve sindirim tamponunun ?o?unu at?n. Peleti par?alamak i?in tüpü hafif?e vurun.

??züm ?imdi ?e?itli büyüklükte hücre kümelerinden olu?uyor. Hücre kümelerini bir tripsin ve bir ROCK inhibit?rü ??zeltisi i?inde yeniden süspanse edin. Tripsin tüm?rü par?alamaya devam eder ve inhibit?r hücre ?lümünü ?nler. Düzenli aral?klarla, kümeleri par?alamak ve hücreleri da??tmak i?in ??zeltiyi pipetleyin. Daha sonra, hücreleri uygun konsantrasyonda matris ??zeltisi i?inde yeniden süspanse etti.

Matris kubbeleri olu?turmak i?in ??zeltinin damlalar?n? bir kültür plakas?na yerle?tirin. Plakalar? bir inkübat?re ba? a?a?? yerle?tirin ve matrisin tamamen kat?la?mas?na izin verin. Ard?ndan, hücre kültürü ortam?n? ekleyin ve sa? taraf? yukar? bakacak ?ekilde inkübe edin. Matris, organoidin ü? boyutlu büyümesini desteklemek i?in bir iskele sa?lar.

K?yma i?leminden sonra, tüm?r par?alar?n? 37 santigrat derecede 1,5 ila 2 saatlik sindirim i?in 15 mililitrelik bir sindirim tamponu tüpüne yerle?tirin. Sindirimin sonunda, sindirilen dokuyu santrifüjleme ile ??keltin ve süpernatan? at?n.

Hücre peletini gev?etmek i?in tüpü hafif?e vurun. Hücreleri, 10 mikromolar Y-27632 ROCK inhibit?rü ile desteklenmi? 1 mililitre ?nceden ?s?t?lm?? tripsin i?inde 37 santigrat derecede 5 dakika boyunca yeniden süspanse edin.

?nkübasyonun sonunda, doku bulamac?n? standart P1000 pipet ucu ile be? kez ezin. 5 dakikal?k ek bir inkübasyon ve ezme i?in tüpü su banyosuna geri koyun.

Matris kubbe kaplama i?in, sindirilmi? hücreleri 9 mililitre so?uk ortamda y?kay?n, ard?ndan hücreleri santrifüjleme ile toplay?n. Hücreleri saymak i?in 1 mililitre taze ortamda yeniden süspanse edin ve sayd?ktan sonra hücreleri bir kez daha santrifüjleme ile toplay?n. Tüm?r hücrelerini uygun matris hacminde seyreltin.

55 santigrat derece ?s?t?lm?? 6 oyuklu bir plakan?n her bir oyu?una 200 mikrolitre matris hücre ??zeltisini dikkatlice b?rak?n. Plakay? 2 dakika boyunca 37 santigrat derece inkübat?re ba? a?a?? yerle?tirmeden ?nce kubbelerin oda s?cakl???nda 20 dakika kat?la?mas?na izin verin.

Kubbeler tamamen kat?la?t???nda, her bir oyu?a androjen R1881 ve ROCK inhibit?rü ile desteklenmi? 2 mililitre prostat organoid ortam? ekleyin. Plakay? hücre kültürü inkübat?rüne geri koyun.

• In vitro tumor models - Methods for studying tumor behavior in lab-controlled conditions.
• PeproTech Noggin - A protein used to regulate cellular processes in tissue culture.
• Tumor model - A method or process used to replicate tumor environment and behavior for scientific studies.
• Cell pellet - Cluster of cells collected at the bottom of a tube after centrifugation.
• ROCK inhibitor organoids - Compounds that prevent cell apoptosis during organoid creation.
• Noggin conditioned media - Media enriched with Noggin protein, used in cellular culture and experiments.
• Cell pellet in tube - Term refers to cells that have been concentrated by centrifugation in a sample tube.

• Introduce In vitro tumor models by defining this as a replicate of tumor behavior (e.g., in vitro tumor models).
• Key Concepts by summarizing principles involved in cell pellet creation (e.g., cell pellet).
• Underlying Mechanisms through visualizing the process of using ROCK inhibitor in organoid creation.
• Connect the process of tumor tissue mincing to the creation of a cell pellet and suspension in a matrix solution.

• What are in vitro tumor models and how to create a cell pellet in lab conditions?
• What role does the PeproTech Noggin play in the tumor model creation?
• How does the ROCK inhibitor assist in the creation of organoids?

• Practical Applications - Tumor models help study cancer growth and potential cures (e.g., in vitro tumor models).
• Industry Impact - Lab studies benefit the healthcare industry and the field of oncology (e.g., ROCK inhibitor organoids).
• Societal Importance - The research contributes to advancements in cancer treatment options (e.g., Noggin conditioned media).
• Link to Scientific Advancements - Understanding tumor behavior facilitates innovative treatment approaches.