Rozpocznij od pobrania p?ytki wielodo?kowej zawieraj?cej przylegaj?ce komórki.

Potraktuj te komórki po?ywk? zawieraj?c? tritiowan? tymidyn? - radioaktywn? wersj? tymidyny - i inkubuj.

Podczas inkubacji aktywnie replikuj?ce si? komórki zawieraj? radioaktywn? tymidyn?. Ta tymidyna paruje si? naprzeciwko adenozyny, generuj?c znakowane radioaktywnie DNA w proliferuj?cych komórkach.

Usuń zu?yte media ze studzienek. Dodaj bufor do lizy, aby zlizowa? komórki i uwolni? DNA do zawiesiny.

Przygotuj zespó? kombajnu komórkowego, umieszczaj?c rurki zbiorcze kombajnu nad do?kami mikrop?ytki.

Zastosuj ci?nienie ssania, aby umo?liwi? aspiracj? zawieszonego DNA ze studzienek. To DNA osadza si? na bibule filtracyjnej, tworz?c okre?lone plamki.

Wytnij szaty z bibu?y filtracyjnej z plamkami DNA. Przenie?? te czady pojedynczo do fiolek scyntylacyjnych.

Na bibu?? filtracyjn? na?o?y? koktajl scyntylacyjny. Umie?ci? fiolk? w p?ynnym liczniku scyntylacyjnym.

Wewn?trz licznika znakowane DNA emituje energi? w wyniku rozpadu radioaktywnego. Energia ta jest poch?aniana przez sk?adniki koktajlu scyntylacyjnego. W końcu sk?adniki koktajlu zaczynaj? przenosi? impulsy, które z kolei s? poch?aniane przez czujnik.

Ilo?? wykrytej radioaktywno?ci okre?la zakres podzia?u komórki.

Umie?? 100 000 komórek w trzech do?kach na p?ytce 24-do?kowej. Po 46 godzinach dodaj tritiowan? tymidyn? do po?ywki hodowlanej i inkubuj w temperaturze 37 stopni Celsjusza przez 2 godziny.

Nast?pnie, po usuni?ciu po?ywki, dodaj 300 mikrolitrów wst?pnie podgrzanej 0,25% trypsyny-EDTA i inkubuj przez 20 minut w temperaturze 37 stopni Celsjusza, aby rozbi? komórki i uwolni? DNA. Nast?pnie w??cz kombajn do kombajnów i pomp?.

Umie?? bibu?? filtracyjn? w kombajnie do komórek. Kontynuuj zbieranie probówek kombajnu komórkowego na pust? pust? tac?. Nast?pnie naci?nij mycie wst?pne, aby zwil?y? bibu?? filtracyjn?. Umie?? probówki zbiorcze w do?kach na próbki i zacznij.

U?yj gor?cego ?ród?a ?wiat?a, aby wysuszy? bibu?? filtracyjn? i u?ó? odpowiednie fiolki na tacy. Wybij papierowe p?ytki do fiolek, a nast?pnie dodaj 2 mililitry p?ynnego koktajlu scyntylacyjnego do ka?dej fiolki.

Inkubowa? fiolki przez 1 godzin? w liczniku scyntylacyjnym przed uruchomieniem maszyny, aby uzyska? liczb? na minut? ka?dej próbki, która odzwierciedla aktywn? syntez? DNA.

• Tritiated Thymidine - A radioactive version of thymidine, used to track cell division.
• Radiolabeled DNA - DNA that incorporates radioactive thymidine during replication.
• Proliferating Cells - Cells that are actively replicating and dividing.
• Cell Harvester - A tool used to collect released DNA from cell lysis.
• Scintillation Assay - A method to measure radioactivity by sensing emitted energy.

• Thymidine is used in DNA replication, and its radioactive version aids in cell tracking (e.g., tritiated thymidine).
• The principle of radioactive decay is crucial to understanding a scintillation assay (e.g., radioactive decay).
• Incorporation of radioactive thymidine allows DNA synthesis tracking (e.g., radiolabeled DNA).
• The amount of radioactivity detected links directly to cell division, the focus of this study.

• What is tritiated thymidine and how does it assist in cell division tracking?
• What role does radioactive decay play in a scintillation assay?
• Why is the detection of radioactivity indicative of cell division?

• In genetic research, tracing cell division using radioactive thymidine holds applicability (e.g., DNA synthesis assay).
• The principle of thymidine incorporation in DNA has significant impact in biotechnology (e.g., thymidine DNA).
• Scintillation assay benefits the healthcare industry in diagnosing cancers and infections (e.g., thymidine proliferation assay).
• A clear understanding of DNA synthesis detection leads to advancement in genomics and therapeutics.